飲料中的難消化性糊精的分析 (LB-802.5)

                                膳食纖維可用于預防血脂異常、便秘和肥胖。 難消化性糊精被認為是 1991 年在日本推出的特定保健用食品（Tokuho）中的一種成分。分析含有大量低分子量水溶性膳食纖維（如難消化性糊精）的樣品，使用酵素-高效液相色譜法。特定保健用食品標準記載了難消化性糊精的定量方法，即對一系列前處理樣品進行 HPLC 分析，并測定膳食纖維部分與甘油（內標物）的峰面積之比。以下是我們對市售的含有難消化性糊精的飲料進行了前處理，并參照 特定保健用食品標準中描述的步驟，使用水溶性SEC用色譜柱OHpak LB-802.5分析的應用實例。 另外，前處理方法與特定保健用食品標準中描述的方法有部分不同。

*根據《食品標簽標準》，低分子量水溶性膳食纖維是指色譜圖中保留時間早于紅色虛線位置（麥芽三糖的洗脫位置）的纖維。

前處理方法

1. 1.將 5 mL飲料樣品溶解在45 mL 0.08 M 磷酸鹽緩沖液（pH 值 6.0）中。

2. 2.加入 0.2 mL α-淀粉酶，確認 pH 為6.0 ± 0.5。 *該樣品的 pH 值為 6.3。

3. 3.放入沸水浴中，在 90 ℃ 下振蕩反應 30 分鐘。

4. 4.冷卻后，加入 0.2 mL 蛋白酶和淀粉葡萄糖苷酶溶液，確認 pH 為6.0 ± 0.5。 *該樣品的 pH 值為 6.3。

5. 5.在 60 ℃ 下振蕩反應 30 分鐘。

6. 6.放入沸水浴中，在 100 ℃ 下加熱 10 分鐘。

7. 7.冷卻后，加入 3 mL用水稀釋 10 倍的甘油。

8. 8.用水定容至100 mL，制成酶處理溶液。

9. 9.將 50 mL 酶處理液以 50 mL/h 的速度通過*離子交換樹脂。
      *Amberlite™ IRA-67 和 Amberlite™ 200CT（杜邦）各25 mL 混合。

10. 10.將約 150 mL 水通過第9步的離子交換樹脂 (總流出液：200 mL）。

11. 11.在旋轉蒸發儀中濃縮。

12. 12.加水定容至 20 mL 。

13. 13.用 0.45 µm 膜過濾器過濾，作為HPLC 樣品。

Sample: 20 μL
Pretreated beverage containing indigestible dextrin

1. 1.Dietary fiber fraction

2. 2.Glucose

3. 3.Glycerin (Internal standard)